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組織肉毒堿棕櫚酰轉移酶I活性比色法定量檢測試劑盒產(chǎn)品說明書

點擊次數(shù):1345 發(fā)布時間:2015/6/4
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主要用途


 組織肉毒堿棕櫚酰轉移酶I(CARNITINE PALMITOYL-TRANSFERASE I)活性比色法定量檢測試劑是一種旨在通過肉堿脂酰輔酶A以及特定抑制劑反應系統(tǒng)中釋放出巰基輔酶A,使用Ellman試劑,產(chǎn)生黃色5-巰基-2-硝基苯甲酸產(chǎn)物吸光峰值的變化,即采用比色法來測定組織裂解樣品中酶活性而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種組織裂解懸液樣品(動物、人體等)肉毒堿棕櫚酰轉移酶I的特異活性檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,操作簡捷,性能穩(wěn)定。


技術背景


脂肪酸β氧化過程(β-oxidation)在動物組織的線粒體發(fā)生的脂肪酸代謝通路,可概括為活化、轉移、β氧化及后經(jīng)三羧酸循環(huán)被*氧化生成CO2H2O,并釋放能量等四個階段。大于10個碳(C10)的活化型長鏈脂酰輔酶A是不能直接透過線粒體內(nèi)膜,需要借助肉堿(camitine),即L-3-4-*基銨丁酸,被轉運入線粒體內(nèi),在線粒體內(nèi)膜的外側及內(nèi)側分別有肉堿脂酰轉移酶(carnitine palmitoyl transferase;CPT;EC2.3.1.21)I。位于內(nèi)膜外側的酶,促進脂酰CoA轉化為脂酰肉堿,后者可借助線粒體內(nèi)膜上的轉位酶(或載體),轉運到內(nèi)膜內(nèi)側,然后,在酶催化下脂酰肉堿釋放肉堿到胞漿,留下脂酰CoA。由此位于胞漿活化脂肪酸―脂酰CoA穿過線粒體內(nèi)膜進入基質(zhì)而被氧化分解。肉堿脂酰轉移酶缺失癥導致機體無法代謝脂肪酸。基于肉堿脂酰輔酶A丙二酰輔酶Amalonyl CoA)存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉移酶的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔酶A(CoA-SH),與Ellman試劑5,5-二硫基-2-硝基苯甲酸[5,5-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid);DTNB]反應后,產(chǎn)生黃色的5-巰基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoic acid;TNB),通過其吸收峰值的變化412nm波長,來定量分析丙二酰輔酶A敏感性肉堿脂酰轉移酶I的特異活性。肉堿脂酰轉移酶I反應系統(tǒng)為:

 
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