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細(xì)胞蛋白磷酸酶1(PP1)活性定磷比色法定量檢測(cè)

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要用途


 細(xì)胞蛋白磷酸酶1(PP1)活性定磷比色法定量檢測(cè)試劑是一種旨在使用特異性底物糖原磷酸化酶a,在PP2A抑制劑存在下,受到PP1去磷酸化后,釋放出游離磷酸根,與孔雀綠染料發(fā)生顯色反應(yīng)后,采用比色法測(cè)定其峰值的變化,以此進(jìn)行測(cè)算單位酶活性的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的其適合于各種細(xì)胞裂解懸液樣品包括免疫沉淀復(fù)合物和粗提或部分純化酶樣品蛋白磷酸化酶1活性及其抑制劑的檢測(cè)。廣泛應(yīng)用于細(xì)胞凋亡、蛋白組學(xué)、病理生理學(xué)、神經(jīng)病變等研究。產(chǎn)品不含污染性蛋白酶,嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,反應(yīng)優(yōu)化,檢測(cè)敏感。


技術(shù)背景


蛋白磷酸化酶1(protein phosphatase 1;PP1;EC 3.1.3.48),又稱為1型蛋白絲/蘇氨酸磷酸化酶,是7個(gè)主要絲/蘇氨酸磷酸化酶(包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6)成員之一,從酵母到人類(lèi)高度進(jìn)化保留。其參與調(diào)節(jié)多種重要的細(xì)胞生理功能,包括糖原代謝、細(xì)胞分裂、肌肉收縮、信號(hào)傳導(dǎo)、神經(jīng)元功能、轉(zhuǎn)錄、翻譯等,以及與HIV-1轉(zhuǎn)錄過(guò)程的調(diào)節(jié),并且與老年性癡呆等多種疾病密切相關(guān)。PP1分子結(jié)構(gòu)表面的3個(gè)凹槽及β 12-β 13 Loop環(huán)結(jié)構(gòu),是底物與抑制劑的結(jié)合部位;其催化亞體為37kd,調(diào)節(jié)亞體有2種:目標(biāo)亞體和抑制亞體?;谔禺愋缘孜锾窃姿峄竌,在PP2A抑制劑福司曲星fostriecin;FOS)存在的情況下,受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用,釋放出游離磷酸根,與孔雀綠(malachite green)染料發(fā)生顯色反應(yīng)后,在分光光度儀下(660nm波長(zhǎng))產(chǎn)生峰值的變化,由此測(cè)定蛋白磷酸化酶1(PP1)的特異活性。

 
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