主要用途

   我公司通用型線粒體DNA損傷超長延展定量PCR擴(kuò)增分析試劑是一種旨在運(yùn)用rTth聚合酶XL進(jìn)行超長延展PCR擴(kuò)增，產(chǎn)生8.9kb線粒體DNA目標(biāo)片段，根據(jù)產(chǎn)物量值的差異，來定量分析線粒體DNA損傷程度的而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。廣泛應(yīng)用于腫瘤、衰老、毒理作用、DNA修復(fù)等研究。產(chǎn)品即到即用，性能穩(wěn)定，無核酶污染，操作便捷，敏感，重復(fù)性強(qiáng)。

注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品為20次操作
• 操作時，須戴手套
• 建議使用帶濾芯的槍頭，避免污染
• 在－20℃冰箱里儲存的產(chǎn)品避免反復(fù)凍融
• 建議樣品為純化的線粒體DNA
• 根據(jù)用戶PCR儀的性能，決定是否加入礦物油（Mineral Oil）

• 本產(chǎn)品適合各種熒光定量PCR儀
• 建議整個操作在4℃下進(jìn)行
• 配制完成后，即刻進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，以確保反應(yīng)物的活性
• PCR擴(kuò)增反應(yīng)的初3個循環(huán)為定量基線；3至15個循環(huán)的熒光信號的10倍值為熒光閾值；熒光信號達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)為Ct值（參考圖像如下)
• Ct值作為端粒酶活性的計量單位
• 用戶可以使用293細(xì)胞（10，100，和1000細(xì)胞數(shù)）作為陽性對照，以此建立標(biāo)準(zhǔn)曲線：橫座標(biāo)（X軸）為細(xì)胞量對數(shù)，縱座標(biāo)（Y軸）為Ct值
• 建議選用正常淋巴細(xì)胞作為正常對照或校正對照，以此作為評價hTERT的參考指標(biāo)；用戶可以選用任何其它正常細(xì)胞或組織，例如腫瘤組織旁的正常組織等
• 建議選用hTERT陽性表達(dá)的MCF7細(xì)胞作為陽性對照，以此構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線：縱坐標(biāo)（Y軸）為Ct值，橫坐標(biāo)（X軸）為已知細(xì)胞量對數(shù)值或拷貝數(shù)或RNA量等，其低有效用量作為樣品檢測量的標(biāo)準(zhǔn)
• 建議使用無模板作為陰性對照
• 內(nèi)參液（Reagent E）為看家基因甘油醛-3-磷酸脫氫酶基因（Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase；GAPDH）作為比較分析時樣品測試用量校正統(tǒng)一的參考標(biāo)準(zhǔn)
• Ct值可以作為hTERT表達(dá)的計量單位，也可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線轉(zhuǎn)換為表達(dá)分子數(shù)進(jìn)行計量
• 本公司提供系列線粒體DNA損傷檢測試劑產(chǎn)品

如:

   通用型線粒體DNA損傷AP位點(diǎn)比色法定量分析試劑盒