動(dòng)物（羊）精子細(xì)胞凍存液產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)

主要用途

動(dòng)物（羊）精子細(xì)胞凍存液是一種旨在幫助深低溫冷凍環(huán)境下儲(chǔ)存各種羊類動(dòng)物精子細(xì)胞，確保其功能完整性和授精能力的保護(hù)性介質(zhì)和而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)由經(jīng)過(guò)精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。適用于各種羊類動(dòng)物精子細(xì)胞的凍存處理。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌，即到即用，性能穩(wěn)定，無(wú)病毒和支原體，維護(hù)精子細(xì)胞活力高達(dá)80％以上。

技術(shù)背景

凍存保護(hù)（Cryopreservation）是長(zhǎng)期儲(chǔ)藏和保存生物活體材料的基本手段。但是，在深低溫（-80℃以下）凍存過(guò)程中活體細(xì)胞將受到物理或化學(xué)性傷害諸如冰結(jié)晶體的形成、滲透壓的變化以及化學(xué)物毒性等，尤其是致命性的活體細(xì)胞活內(nèi)冰產(chǎn)生，所導(dǎo)致?tīng)垦雍涂s水等物理性損傷。作為凍存保護(hù)劑之一的甘油（glycerol）被證實(shí)能夠阻止冰晶體的發(fā)生。使用二糖類分子和蛋黃液（egg yolk），可以維持精子細(xì)胞結(jié)構(gòu)功能完整性、運(yùn)動(dòng)能力、存活率、穿透力、人工授精能力和繁殖能力（fecundity）等。

產(chǎn)品內(nèi)容

凍存液（Reagent A）                      20毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                       1份

保存方式

保存凍存液（Reagent A）在－20℃的冰箱里，有效保證6月

用戶自備

2毫升凍存管：用于精子細(xì)胞冷凍儲(chǔ)藏的容器

液氮罐：用于精子細(xì)胞深凍儲(chǔ)存

實(shí)驗(yàn)步驟

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將試劑盒里的凍存液（Reagent A）從－20℃的冰箱里取出，置于室溫下預(yù)熱。然后進(jìn)行下列操作。

1． 準(zhǔn)備好新鮮收集（1小時(shí)內(nèi)）的精液到15毫升錐形離心管

2． 放進(jìn)37℃培養(yǎng)箱孵育30分鐘

3． 移取1毫升（10 X 10⁶/毫升）到2毫升凍存管

4． 一滴一滴加入1毫升凍存液（Reagent A），混勻

5． 室溫下靜置10分鐘

6． 轉(zhuǎn)移到降溫控制冰箱，降溫速度為1度/分鐘

7． 直至降溫到-80℃

8． 即刻轉(zhuǎn)移到液氮罐里長(zhǎng)期保存

注意事項(xiàng)

1． 本產(chǎn)品為20毫升規(guī)格

2． 所有凍存操作和使用工具均須在嚴(yán)格無(wú)菌狀態(tài)下進(jìn)行

3． 操作時(shí)，避免污染母液

4． 可以按照1：1至1:3比例加入凍存液（Reagent A），例如1毫升精子細(xì)胞懸液加入1至3毫升凍存液（Reagent A）

5． 解凍的基本原則是快速放進(jìn)37℃恒溫水槽瞬時(shí)解凍，這樣可以確保細(xì)胞的存活質(zhì)量

6． 本公司提供系列精子細(xì)胞凍存試劑產(chǎn)品
  

質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定性能穩(wěn)定

2． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)噬菌體（Bacteriophage）

3． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)支原體（Mycoplasmas）

4． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)細(xì)菌和真菌

5． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定無(wú)病毒（Akabane,Blue Tongue,Bovine Adenovirus FA,Bovine Parovirus FA,Bovine Respiratory Syncytial Virus FA, Bovine Viral Diarrhea Virus FA, Reovirus FA, Rabies Virus FA等）

6． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定符合美國(guó)體外組織培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)的規(guī)定：化學(xué)成分、滲透壓、pH、內(nèi)毒素、存活能力等

7． 本產(chǎn)品經(jīng)鑒定維護(hù)精子細(xì)胞活力高達(dá)80％以上